V čistih prostorih obstajata dva glavna vira kontaminacije: delci in mikroorganizmi, ki jih lahko povzročijo človeški in okoljski dejavniki ali povezane dejavnosti v procesu. Kljub vsem prizadevanjem bo kontaminacija še vedno prodrla v čisti prostor. Posebni običajni nosilci onesnaženja vključujejo človeška telesa (celice, lasje), okoljske dejavnike, kot so prah, dim, megla ali oprema (laboratorijska oprema, čistilna oprema) in neustrezne tehnike brisanja in metode čiščenja.
Najpogostejši prenašalec okužbe so ljudje. Tudi z najstrožjimi oblačili in najstrožjimi operativnimi postopki so neustrezno usposobljeni operaterji največja grožnja kontaminacije v čistih prostorih. Zaposleni, ki ne upoštevajo smernic čistih prostorov, so dejavnik visokega tveganja. Dokler en zaposleni naredi napako ali pozabi korak, bo to povzročilo kontaminacijo celotne čiste sobe. Podjetje lahko zagotovi čistočo čistega prostora le z nenehnim spremljanjem in nenehnim posodabljanjem usposabljanja z ničelno stopnjo kontaminacije.
Drugi glavni viri kontaminacije so orodja in oprema. Če voziček ali stroj le grobo obrišete, preden vstopite v čisti prostor, lahko prinese mikroorganizme. Delavci se pogosto ne zavedajo, da se oprema na kolesih kotali po onesnaženih površinah, ko jo potiskajo v čisti prostor. Površine (vključno s tlemi, stenami, opremo itd.) se rutinsko testirajo glede števila sposobnih za preživetje z uporabo posebej oblikovanih kontaktnih plošč, ki vsebujejo gojišča za gojenje, kot sta Trypticase Soy Agar (TSA) in Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA je rastni medij za bakterije, SDA pa rastni medij za plesni in kvasovke. TSA in SDA se običajno inkubirata pri različnih temperaturah, pri čemer je TSA izpostavljen temperaturam v območju 30–35˚C, kar je optimalna temperatura za rast večine bakterij. Območje 20–25˚C je optimalno za večino vrst plesni in kvasovk.
Pretok zraka je bil nekoč pogost vzrok kontaminacije, vendar so današnji sistemi HVAC za čiste prostore praktično odpravili kontaminacijo zraka. Zrak v čistih prostorih se redno nadzoruje in spremlja (npr. dnevno, tedensko, četrtletno) glede števila delcev, števila živih snovi, temperature in vlažnosti. Filtri HEPA se uporabljajo za nadzor števila delcev v zraku in lahko filtrirajo delce do velikosti 0,2 µm. Ti filtri običajno neprekinjeno delujejo s kalibrirano hitrostjo pretoka, da se ohrani kakovost zraka v prostoru. Vlažnost se običajno vzdržuje na nizki ravni, da se prepreči širjenje mikroorganizmov, kot so bakterije in plesen, ki imajo raje vlažna okolja.
Pravzaprav je najvišja stopnja in najpogostejši vir kontaminacije v čistih prostorih operater.
Viri in vstopne poti onesnaženja se od industrije do industrije bistveno ne razlikujejo, obstajajo pa razlike med panogami glede dopustnih in nedopustnih stopenj onesnaženja. Proizvajalcem tablet za zaužitje na primer ni treba vzdrževati enake ravni čistoče kot proizvajalcem sredstev za injiciranje, ki se neposredno vnesejo v človeško telo.
Farmacevtski proizvajalci imajo nižjo toleranco za kontaminacijo z mikrobi kot proizvajalci visokotehnološke elektronike. Proizvajalci polprevodnikov, ki proizvajajo mikroskopske izdelke, ne morejo sprejeti kakršne koli kontaminacije z delci, da bi zagotovili funkcionalnost izdelka. Zato ta podjetja skrbi le za sterilnost izdelka, ki ga bodo vsadili v človeško telo, in funkcionalnost čipa ali mobilnega telefona. Razmeroma manj jih skrbijo plesni, glive ali druge oblike mikrobne kontaminacije v čistih prostorih. Po drugi strani pa so farmacevtska podjetja zaskrbljena zaradi vseh živih in mrtvih virov kontaminacije.
Farmacevtsko industrijo ureja FDA in mora strogo upoštevati predpise dobre proizvodne prakse (GMP), ker so posledice kontaminacije v farmacevtski industriji zelo škodljive. Ne samo, da morajo proizvajalci zdravil zagotoviti, da so njihovi izdelki brez bakterij, od njih se zahteva tudi dokumentacija in sledenje vsemu. Podjetje, ki se ukvarja z visokotehnološko opremo, lahko dostavi prenosni računalnik ali televizor, če opravi notranjo presojo. Toda za farmacevtsko industrijo ni tako preprosto, zato je za podjetje ključnega pomena, da ima, uporablja in dokumentira operativne postopke čistih prostorov. Zaradi stroškov številna podjetja najemajo zunanje profesionalne čistilne storitve za izvajanje storitev čiščenja.
Celovit program okoljskega testiranja čistih prostorov mora vključevati vidne in nevidne delce v zraku. Čeprav ni zahteve, da bi mikroorganizmi identificirali vse onesnaževalce v teh nadzorovanih okoljih. Program nadzora okolja mora vključevati ustrezno raven bakterijske identifikacije ekstrakcij vzorcev. Trenutno je na voljo veliko metod za identifikacijo bakterij.
Prvi korak pri identifikaciji bakterij, zlasti ko gre za izolacijo v čistih prostorih, je metoda barvanja po Gramu, saj lahko zagotovi interpretativne namige o viru mikrobne kontaminacije. Če mikrobna izolacija in identifikacija pokažeta po Gramu pozitivne koke, je okužba morda prišla od ljudi. Če mikrobna izolacija in identifikacija pokažeta po Gramu pozitivne paličice, je kontaminacija morda nastala zaradi prahu ali sevov, odpornih na razkužila. Če mikrobna izolacija in identifikacija pokažeta po Gramu negativne palice, je vir kontaminacije morda voda ali katera koli mokra površina.
Identifikacija mikrobov v čistih farmacevtskih prostorih je zelo potrebna, ker je povezana s številnimi vidiki zagotavljanja kakovosti, kot so biološki testi v proizvodnih okoljih; testiranje bakterijske identifikacije končnih izdelkov; neimenovani organizmi v sterilnih izdelkih in vodi; kontrola kakovosti tehnologije fermentacijskega skladiščenja v biotehnološki industriji; in preverjanje mikrobnega testiranja med validacijo. Metoda FDA za potrditev, da bakterije lahko preživijo v določenem okolju, bo postala vse pogostejša. Kadar ravni mikrobne kontaminacije presežejo določeno raven ali rezultati testa sterilnosti kažejo na kontaminacijo, je treba preveriti učinkovitost čistilnih in dezinfekcijskih sredstev ter odpraviti identifikacijo virov kontaminacije.
Obstajata dva načina za spremljanje okoljskih površin čistih prostorov:
1. Kontaktne plošče
Te posode za posebne kulture vsebujejo sterilno rastno gojišče, ki je pripravljeno višje od roba posode. Pokrov kontaktne plošče pokriva površino, ki jo je treba vzorčiti, in vsi mikroorganizmi, vidni na površini, se bodo oprijeli površine agarja in inkubirali. Ta tehnika lahko pokaže število mikroorganizmov, vidnih na površini.
2. Metoda brisa
Ta je sterilen in shranjen v primerni sterilni tekočini. Bris se nanese na preskusno površino in mikroorganizem se identificira tako, da se bris pridobi v mediju. Brisi se pogosto uporabljajo na neravnih površinah ali na področjih, ki jih je težko vzorčiti s kontaktno ploščico. Vzorčenje brisa je bolj kvalitativni test.
Čas objave: 21. oktober 2024