1. Namen: Cilj tega postopka je zagotoviti standardiziran postopek za aseptične operacije in zaščito sterilnih prostorov.
2. Obseg uporabe: Laboratorij za biološko testiranje
3. Odgovorna oseba: preizkuševalec nadzornika QC
4. DEFINIJA: Brez
5. Varnostni ukrepi
Strogo izvajati aseptične operacije za preprečevanje mikrobne kontaminacije; Operaterji morajo pred vstopom v sterilno sobo izklopiti UV svetilko.
6. Procedures
6.1. Sterilna soba mora biti opremljena s sterilno operacijsko sobo in varovalnim prostorom. Čistost sterilnega operacijskega prostora mora doseči razred 10000. V zaprtih prostorih je treba vzdrževati pri 20-24 ° C, vlažnost pa je treba vzdrževati pri 45-60%. Čistost čiste klopi naj bi dosegla 100 razreda.
6.2. Sterilno sobo je treba ohraniti čisto in strogo prepovedano nabiranje naplavin, da se prepreči kontaminacija.
6.3. Strogo preprečimo kontaminacijo vse opreme za sterilizacijo in kulturnih medijev. Tisti, ki so onesnaženi, bi jih morali prenehati uporabljati.
6.4. Sterilna soba mora biti opremljena z delovnimi koncentracijskimi razkužitvami, kot so 5% raztopina Cresol, 70% alkohola, 0,1% raztopine klormetionina itd.
6.5. Sterilno sobo je treba redno sterilizirati in očistiti z ustreznim razkužilom, da se zagotovi, da čistost sterilne sobe izpolnjuje zahteve.
6.6. Vse instrumente, instrumente, jedi in druge predmete, ki jih je treba vnesti v sterilno sobo, je treba tesno oviti in sterilizirati z ustreznimi metodami.
6.7. Pred vstopom v sterilno sobo se mora osebje umivati z milom ali razkužilom, nato pa se pred vstopom v sterilno sobo preklopiti v posebna delovna oblačila, čevlje, klobuke, maske in rokavice v varovalni sobi (ali z roke z 70% etanol). Izvajati operacije v bakterijski komori.
6.8. Preden uporabite sterilno sobo, je treba ultravijolično svetilko v sterilni sobi vklopiti za obsevanje in sterilizacijo več kot 30 minut, čisto klop pa je treba hkrati vklopiti za pihanje zraka. Po zaključku operacije je treba sterilno sobo pravočasno očistiti in nato 20 minut sterilizirati z ultravijolično svetlobo.
6.9. Pred pregledom je treba zunanjo embalažo preskusnega vzorca ohraniti nedotaknjeno in je ne smete odpreti, da se prepreči kontaminacija. Pred pregledom uporabite 70% bombažne kroglice za alkohol, da razkužite zunanjo površino.
6.10. Med vsako operacijo je treba opraviti negativno kontrolo, da se preveri zanesljivost aseptičnega delovanja.
6.11. Ko absorbirate bakterijsko tekočino, morate s sesalno kroglico uporabiti, da jo absorbirate. Ne dotikajte se slame neposredno z usti.
6.12. Igla inokulacije je treba sterilizirati s plamenom pred in po vsaki uporabi. Po hlajenju lahko kulturo inokuliramo.
6.13. Slamice, epruvete, petrijeve posode in drugi pripomočki, ki vsebujejo bakterijsko tekočino, je treba namočiti v vedro sterilizacije, ki vsebuje 5% raztopino lizola za razkužilo, in odvzeti in izpeljati po 24 urah.
6.14. Če se na mizi ali tleh razlije bakterijska tekočina, naj vsaj 30 minut na onesnaženo območje takoj nalijete 5% raztopine karbolične kisline ali 3% lizola na onesnaženo območje. Kadar so delovna oblačila in klobuki onesnaženi z bakterijsko tekočino, jih je treba takoj odstraniti in oprati po visokotlačni sterilizaciji pare.
6.15. Vse predmete, ki vsebujejo žive bakterije, je treba razkužiti, preden jih izperete pod pipo. Strogo prepovedano je onesnažiti kanalizacijo.
6.16. Število kolonij v sterilni sobi je treba preveriti mesečno. S čisto klopjo odprite številne sterilne petrijeve jedi z notranjim premerom 90 mm in aseptično vbrizgajte približno 15 ml gojišča hranilnega agarja, ki je bil storjen in ohlajen na približno 45 ° C. Po strjevanju ga postavite na glavo na 30 do 35 inkubirajte 48 ur v ℃ inkubatorju. Ko dokažete sterilnost, vzemite 3 do 5 plošč in jih postavite na levo, srednjo in desno od delovnega položaja. Ko odprete pokrov in jih razkrijete 30 minut, jih postavite na glavo v 30 do 35 ° C inkubator 48 ur in jih vzemite ven. Preuči. Povprečno število različnih bakterij na plošči na čistem območju razreda 100 ne sme presegati 1 kolonije, povprečno število v čisti sobi razreda 10000 pa ne sme presegati 3 kolonije. Če je meja presežena, je treba sterilno sobo temeljito razkužiti, dokler večkratni inšpekcijski pregledi ne izpolnjujejo zahtev.
7. Glejte poglavje (metoda pregledovanja sterilnosti) v "metodah higienskih pregledov zdravil" in "Kitajske standardne operativne prakse za pregled drog".
8. Oddelek za distribucijo: Oddelek za upravljanje kakovosti
Čista soba Tehnična navodila:
Po pridobitvi sterilnega okolja in sterilnih materialov moramo ohraniti sterilno stanje, da preučimo določen znani mikroorganizem ali uporabimo njihove funkcije. V nasprotnem primeru se lahko različni mikroorganizmi od zunaj zlahka mešajo. Pojav mešanja nepomembnih mikroorganizmov iz zunaj imenuje kontaminirajoče bakterije v mikrobiologiji. Preprečevanje kontaminacije je ključna tehnika pri mikrobiološkem delu. Popolna sterilizacija na eni strani in preprečevanje kontaminacije na drugi sta dva vidika aseptične tehnike. Poleg tega moramo preprečiti preučene mikroorganizme, zlasti patogene mikroorganizme ali gensko inženirne mikroorganizme, ki v naravi ne obstajajo, od pobega iz našega eksperimentalnega zabojnikov v zunanje okolje. Za te namene je v mikrobiologiji veliko ukrepov.
Sterilna soba je običajno majhna soba, ki je posebej postavljena v mikrobiološki laboratorij. Lahko se zgradi s rjuhami in steklom. Območje ne bi smelo biti preveliko, približno 4-5 kvadratnih metrov, višina pa naj bo približno 2,5 metra. Predsedna soba je treba postaviti zunaj sterilne sobe. Vrata varovalne prostore in vrata sterilne sobe se ne smejo soočiti z isto smerjo, da bi preprečili, da bi zračni tok prinesla različne bakterije. Tako sterilna soba kot varovalna soba morata biti neprepustna. Notranja prezračevalna oprema mora imeti naprave za filtracijo zraka. Tla in stene sterilne sobe morajo biti gladka, težko je pristati umazanijo in jih je enostavno očistiti. Delovna površina mora biti raven. Tako sterilna in varovalna soba sta opremljena z ultravijoličnimi lučmi. Ultravijolične luči v sterilni sobi so 1 metra stran od delovne površine. Osebje, ki vstopa v sterilno sobo, bi moralo nositi sterilizirana oblačila in klobuke.
Trenutno sterilne sobe večinoma obstajajo v tovarnah mikrobiologije, medtem ko splošni laboratoriji uporabljajo čisto klop. Glavna funkcija čiste klopi je uporaba laminarne naprave za pretok zraka za odstranjevanje različnih drobnih prahu, vključno z mikroorganizmi na delovni površini. Električna naprava omogoča, da zrak prehaja skozi HEPA filter in nato vstopi v delovno površino, tako da se delovna površina vedno hrani pod nadzorom tekočega sterilnega zraka. Poleg tega je zračna zavesa visoke hitrosti na strani blizu zunaj, da prepreči vstop zunanjega bakterijskega zraka.
V mestih s težkimi pogoji lahko namesto čiste klopi uporabite tudi lesene sterilne škatle. Sterilna škatla ima preprosto strukturo in jo je enostavno premikati. Na sprednji strani škatle sta dve luknji, ki jih blokirajo s push-pulskimi vrati, ko ne delujejo. Med delovanjem lahko iztegnete roke. Zgornji del sprednjega dela je opremljen s steklom, da se olajša notranje delovanje. V škatli je ultravijolična svetilka, pripomočke in bakterije pa lahko postavite skozi majhna vrata na strani.
Aseptične tehnike delovanja trenutno ne igrajo samo ključne vloge v mikrobioloških raziskavah in aplikacijah, ampak se pogosto uporabljajo tudi v številnih biotehnologijah. Na primer, transgena tehnologija, tehnologija monoklonskih protiteles, ETC.
Čas objave: Mar-06-2024