1. Namen: Namen tega postopka je zagotoviti standardiziran postopek za aseptične operacije in zaščito sterilnih prostorov.
2. Področje uporabe: laboratorij za biološka testiranja
3. Odgovorna oseba: QC Supervisor Tester
4. Opredelitev: Brez
5. Varnostni ukrepi
Strogo izvajajte aseptične postopke, da preprečite mikrobno kontaminacijo;operaterji morajo ugasniti UV žarnico, preden vstopijo v sterilno sobo.
6. Postopki
6.1.Sterilna soba mora biti opremljena s sterilno operacijsko sobo in varovalno sobo.Čistoča sterilne operacijske sobe mora biti v razredu 10000. Notranja temperatura mora biti 20-24 ° C, vlažnost pa 45-60%.Čistoča čiste klopi mora doseči razred 100.
6.2.Sterilni prostor mora biti čist in je strogo prepovedano nabirati odpadke, da preprečite kontaminacijo.
6.3.Strogo preprečite kontaminacijo vse sterilizacijske opreme in gojišč.Tisti, ki so okuženi, naj jih prenehajo uporabljati.
6.4.Sterilni prostor mora biti opremljen z razkužili z delovno koncentracijo, kot so 5% raztopina krezola, 70% alkohol, 0,1% raztopina klormetionina itd.
6.5.Sterilno sobo je treba redno sterilizirati in čistiti z ustreznim razkužilom, da zagotovimo, da čistoča sterilne sobe ustreza zahtevam.
6.6.Vsi instrumenti, instrumenti, posode in drugi predmeti, ki jih je treba prinesti v sterilno sobo, morajo biti tesno zaviti in sterilizirani z ustreznimi metodami.
6.7.Pred vstopom v sterilno sobo si mora osebje umiti roke z milom ali razkužilom, nato pa se v varovalni sobi preobleči v posebna delovna oblačila, obutev, pokrivala, maske in rokavice (ali si ponovno obrisati roke s 70% etanolom) pred vstopom v sterilno sobo.Izvedite operacije v bakterijski komori.
6.8.Pred uporabo sterilnega prostora mora biti ultravijolična svetilka v sterilnem prostoru vključena za obsevanje in sterilizacijo za več kot 30 minut, hkrati pa mora biti čista miza vključena za vpihovanje zraka.Po končani operaciji je treba sterilno sobo pravočasno očistiti in nato sterilizirati z ultravijolično svetlobo 20 minut.
6.9.Pred pregledom je treba zunanjo embalažo preskusnega vzorca ohraniti nedotaknjeno in je ne smete odpreti, da preprečite kontaminacijo.Pred pregledom uporabite vato, raztopljeno v 70 % alkoholu, da razkužite zunanjo površino.
6.10.Med vsako operacijo je treba opraviti negativno kontrolo, da se preveri zanesljivost aseptičnega delovanja.
6.11.Ko absorbirate bakterijsko tekočino, morate uporabiti sesalno kroglo, da jo absorbirate.Ne dotikajte se slamice neposredno z usti.
6.12.Iglo za cepljenje je treba pred in po vsaki uporabi sterilizirati s plamenom.Po ohlajanju lahko kulturo cepimo.
6.13.Slamice, epruvete, petrijevke in druge pripomočke, ki vsebujejo bakterijsko tekočino, je treba za razkuževanje namočiti v sterilizacijsko vedro, ki vsebuje 5 % raztopino lizola, ter jih po 24 urah vzeti ven in sprati.
6.14.Če se po mizi ali tleh razlije bakterijska tekočina, morate kontaminirano območje nemudoma preliti s 5 % raztopino karbolne kisline ali 3 % lizola za vsaj 30 minut, preden ga obdelate.Ko so delovna oblačila in klobuki kontaminirani z bakterijsko tekočino, jih je treba takoj sleči in oprati po sterilizaciji s paro pod visokim pritiskom.
6.15.Vse predmete, ki vsebujejo žive bakterije, je treba pred izpiranjem pod vodo razkužiti.Strogo je prepovedano onesnaževati kanalizacijo.
6.16.Število kolonij v sterilni sobi je treba preverjati mesečno.Z odprto čisto mizo vzemite več sterilnih petrijevk z notranjim premerom 90 mm in aseptično injicirajte približno 15 ml hranilnega agar gojišča, ki je bil stopljen in ohlajen na približno 45 °C.Po strjevanju ga postavite na glavo pri 30 do 35 °C. Inkubirajte 48 ur v inkubatorju pri ℃.Po dokazovanju sterilnosti vzemite 3 do 5 krožnikov in jih postavite na levo, sredino in desno od delovnega položaja.Ko odprete pokrov in jih izpostavite 30 minut, jih postavite obrnjene navzdol v inkubator pri 30 do 35 °C za 48 ur in jih vzemite ven.pregledati.Povprečno število raznih bakterij na ploščici v čistem prostoru razreda 100 ne sme presegati 1 kolonije, povprečno število v čisti sobi razreda 10000 pa ne sme presegati 3 kolonij.Če je meja presežena, je treba sterilno sobo temeljito razkužiti, dokler ponovni pregledi ne izpolnjujejo zahtev.
7. Glejte poglavje (Metoda pregleda sterilnosti) v "Metode higienskega pregleda zdravil" in "Kitajske standardne operativne prakse za pregled zdravil".
8. Oddelek za distribucijo: Oddelek za vodenje kakovosti
Tehnična navodila za čisto sobo:
Po pridobitvi sterilnega okolja in sterilnih materialov moramo vzdrževati sterilno stanje, da preučujemo določene znane mikroorganizme ali izkoriščamo njihove funkcije.V nasprotnem primeru se zlahka pomešajo različni mikroorganizmi od zunaj. Pojav mešanja nepomembnih mikroorganizmov od zunaj v mikrobiologiji imenujemo kontaminantne bakterije.Preprečevanje kontaminacije je kritična tehnika pri mikrobiološkem delu.Popolna sterilizacija na eni strani in preprečevanje kontaminacije na drugi sta dva vidika aseptične tehnike.Poleg tega moramo preprečiti, da bi proučevani mikroorganizmi, zlasti patogeni mikroorganizmi ali gensko spremenjeni mikroorganizmi, ki v naravi ne obstajajo, iz naših eksperimentalnih posod pobegnili v zunanje okolje.Za te namene v mikrobiologiji obstaja veliko ukrepov.
Sterilna soba je običajno majhna soba, posebej urejena v mikrobiološkem laboratoriju.Lahko se zgradi s ploščami in steklom.Območje ne sme biti preveliko, približno 4-5 kvadratnih metrov, višina pa približno 2,5 metra.Zunaj sterilne sobe je treba postaviti varovalno sobo.Vrata tamponske sobe in vrata sterilne sobe ne smejo biti obrnjena v isto smer, da preprečite, da bi zračni tok vnesel razne bakterije.Tako sterilna soba kot tamponska soba morata biti nepredušna.Oprema za prezračevanje notranjih prostorov mora imeti naprave za filtriranje zraka.Tla in stene sterilne sobe morajo biti gladke, težko zadrževati umazanijo in enostavne za čiščenje.Delovna površina mora biti ravna.Sterilna soba in varovalna soba sta opremljeni z ultravijoličnimi lučmi.Ultravijolične luči v sterilni sobi so 1 meter oddaljene od delovne površine.Osebje, ki vstopa v sterilno sobo, mora nositi sterilizirana oblačila in pokrivala.
Trenutno so sterilne sobe večinoma v mikrobioloških tovarnah, medtem ko splošni laboratoriji uporabljajo čiste mize.Glavna funkcija čiste mize je uporaba naprave za laminarni pretok zraka za odstranjevanje različnega drobnega prahu, vključno z mikroorganizmi, na delovni površini.Električna naprava omogoča, da zrak prehaja skozi hepa filter in nato vstopi na delovno površino, tako da je delovna površina vedno pod nadzorom pretoka sterilnega zraka.Poleg tega je na strani blizu zunanje strani nameščena zračna zavesa visoke hitrosti, ki preprečuje vstop zunanjega bakterijskega zraka.
Na mestih s težkimi pogoji lahko namesto čiste klopi uporabimo tudi lesene sterilne škatle.Sterilna škatla ima preprosto strukturo in jo je enostavno premikati.Na sprednji strani škatle sta dve luknji, ki ju blokirajo potisna vrata, ko ne delujejo.Med delovanjem lahko iztegnete roke.Zgornji del sprednje strani je opremljen s steklom za lažje notranje delovanje.V notranjosti škatle je ultravijolična svetilka, posodo in bakterije pa lahko vstavite skozi majhna vratca ob strani.
Aseptične operativne tehnike trenutno nimajo osrednje vloge le v mikrobioloških raziskavah in aplikacijah, ampak se pogosto uporabljajo tudi v številnih biotehnologijah.Na primer transgenska tehnologija, tehnologija monoklonskih protiteles itd.
Čas objave: mar-06-2024